从背景到前景:偶联亲脂性ATTO染料的二级抗体实现超分辨率显微镜与扩增显微镜中的高密度膜标记

root 提交于 周二, 07/14/2026 - 04:47
经典免疫标记方法能够在宽场显微镜和共聚焦分辨率下实现细胞膜和细胞器的均一且连续的标记。然而,在超分辨显微镜和膨胀显微镜中,高密度标记的缺乏阻碍了膜蛋白和蛋白复合物在其膜环境中的定位。在此,我们表明,偶联亲脂性染料 ATTO 647N 或 ATTO 550 的二级抗体能够对固定、透化细胞的核膜、线粒体和内质网进行明亮标记,并且梯度化的标记强度可实现细胞器的选择性可视化以及线粒体的精确分割。借助当前最先进的超分辨显微镜和膨胀显微镜技术,我们实现了对核膜和线粒体膜的高密度标记,其靶向性和标记密度与现有膜标记方法相当,并且该信号还可通过添加额外的二级抗体进一步放大。最后,我们表明,这些染料偶联的 IgG 可用于分辨线粒体-内质网接触、线粒体超微结构,以及对核膜及其内陷结构的精确可视化。本研究表明,与亲脂性荧光团偶联的二级抗体是在常规显微镜中进行细胞器可视化,以及在超分辨显微镜和膨胀显微镜中实现膜高密度标记的稳定、便捷且经济的工具。

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doi: https://doi.org/10.64898/2026.07.10.737767

Jim P. Dompierre 生物化学与细胞遗传学研究所(IBGC)/ 法国国家科学研究中心(CNRS)- 波尔多大学 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方,其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY-NC 4.0 国际许可协议 提供。

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发表于 2026 年 7 月 13 日。

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Jim P. Dompierre Silvia del Pozo Perera Louis Hurson Arnaud Mourier Anne Devin Manuel Rojo

bioRxiv 2026.07.10.737767; doi: https://doi.org/10.64898/2026.07.10.737767

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Jim P. Dompierre Silvia del Pozo Perera Louis Hurson Arnaud Mourier Anne Devin Manuel Rojo

bioRxiv 2026.07.10.737767; doi: https://doi.org/10.64898/2026.07.10.737767


📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.10.737767v1?rss=1

🏷️ 超分辨率显微镜 扩增显微镜 膜高密度标记 二级抗体 亲脂性ATTO染料 细胞器膜可视化