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脂质过氧化（LPO）被广泛用作珊瑚白化研究中氧化应激的生物标志物，然而其测定方法在该领域内仍缺乏良好的标准化。对珊瑚LPO文献的系统综述显示，方法学路径存在显著差异，包括组织组分分析、裂解方案、检测方法的选择以及归一化指标，这些差异混淆了不同研究之间的比较，并模糊了结果的生物学解释。我们通过实验考察了两个关键的变异来源：采用整体共生体组分还是分离的宿主与藻类共生体组分，以及归一化指标的选择。为此，我们在一项受控的中尺度生态系统实验中，使用星洞珊瑚（Montastraea cavernosa，n = 6个群体），并将其暴露于环境温度（28C）、热胁迫（30.5C）以及热胁迫+人工上升流（AU；热胁迫被每日脉冲式较冷海水间歇打断，30.5/27.5C）条件下。采用基于TBARS的MDA检测法，并结合针对珊瑚组织优化的裂解缓冲液，我们在一天中的四个时间点分别测定了珊瑚宿主组分和藻类共生体组分中的LPO。宿主MDA在所有处理和时间点上均保持稳定，这与实验期间具有足够的抗氧化缓冲能力或发生了热适应相一致。相比之下，藻类共生体MDA表现出显著的昼夜节律性和处理特异性动态变化，而且两个组分的响应彼此解耦。与按总蛋白含量归一化相比，按珊瑚表面积对MDA进行归一化总体上产生了相一致的昼夜和处理模式，但两种指标在特定时间点上出现分歧，这表明归一化选择并非可互换，并且其本身也会影响结果解释。综上，我们的文献综述和实证结果表明，当宿主与藻类共生体LPO动态被聚合处理时，二者不可直接比较；因此，我们主张将宿主—共生体组分分离以及采用一致且明确报告的归一化方式，作为获得可解释且可跨研究比较的珊瑚LPO测定结果的最低标准。
脂质过氧化（lipid peroxidation, LPO）在珊瑚白化研究中被广泛用作氧化胁迫的生物标志物，但其测定方法在该领域内仍缺乏充分标准化。对珊瑚LPO相关文献的系统综述表明，方法学上存在显著差异，包括组织组分分析、裂解方案、检测方法选择以及归一化指标等，这些差异干扰了跨研究比较，并模糊了结果的生物学解释。我们通过实验考察了两个关键变异来源：整体共生体（holobiont）与分离的宿主和藻类共生体组分的使用，以及归一化指标的选择。为此，我们在受控中尺度生态系统实验中使用了Montastraea cavernosa（n = 6个群体），并将其暴露于环境温度（28C）、热胁迫（30.5C）以及热胁迫+人工上升流（AU；热胁迫被每日脉冲式较冷海水间歇打断，30.5/27.5C）条件下。采用基于TBARS的MDA检测法，并使用针对珊瑚组织优化的裂解缓冲液，我们在一天中的四个时间点分别测定了珊瑚宿主和藻类共生体组分中的LPO。宿主MDA在所有处理和时间点上均保持稳定，这与实验期间具备充足的抗氧化缓冲能力或发生了热适应相一致。相比之下，藻类共生体MDA表现出显著的昼夜变化及处理特异性动态，且两种组分的响应彼此脱耦。与按总蛋白含量归一化相比，按珊瑚表面积归一化MDA总体上产生了基本一致的昼夜和处理模式，但两种指标在特定时间点出现分歧，表明归一化选择并非可以互换，其本身也会影响结果解释。综上，我们的文献综述和实证结果表明，当宿主和藻类共生体LPO动态被合并时，二者并不具有可比性，因此我们主张将宿主—共生体组分分离，并采用一致且明确报告的归一化方法，作为获得可解释且可跨研究比较的珊瑚LPO测定的最低标准。
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📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.08.737270v1?rss=1
🏷️ 珊瑚白化 脂质过氧化 氧化应激 宿主-共生体分离 方法标准化