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鉴于类固醇在多种生物过程中发挥关键作用，对类固醇进行全面检测——而非仅限于临床化学实验室通常分析的有限项目——已变得日益重要。然而，类固醇定量面临若干分析挑战，包括整个类固醇代谢网络中不同化合物之间电离效率的差异以及结构相似性。 为应对这些挑战，我们开发了一种靶向超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）方法，采用反相色谱结合快速极性切换，对21种类固醇进行分析。质谱（MS）分析采用计划多反应监测（sMRM）模式。根据类固醇种类和基质的不同，经验证的定量下限（LLOQ）在血浆中为12.0 pM至1216 pM，在粪便样本匀浆中为41.1 pM至384 pM。在脂肪组织中，其范围为0.01 pmol/g至9 pmol/g。 从商业质控样品（MassTrak Steroid Serum QC Set 1 和 MassCheck Steroid Panel 1 Serum Control）获得的类固醇浓度测定值与参考值高度一致。作为概念验证，该方法已成功应用于多个项目中的469份血浆样本、15份脂肪组织样本以及332份粪便样本，证明了其在大规模研究中的适用性。 总之，该方法能够在无需衍生化的条件下，对血浆及复杂生物基质（包括脂肪组织和粪便样本）中的扩展类固醇谱进行高灵敏度定量，代表了类固醇综合谱分析领域的一项重要进展。
采用超高效液相色谱-串联质谱法对人血浆、脂肪组织和粪便样持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY-NC 4.0 国际许可协议 发布。
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发布于 2026年7月9日。
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采用超高效液相色谱-串联质谱法对人血浆、脂肪组织和粪便样本中21种类固醇进行定量测定
Ilia Evstafev， Matilda Krakstrom， Niina Saarinen-Aaltonen， Janne Hakkarainen， Merja R. Hakkinen， Seppo Auriola， Peter J Bostrom， Matti Poutanen， Matej Oresic， Alex M. Dickens
bioRxiv 2026.07.08.737297； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.08.737297
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采用超高效液相色谱-串联质谱法对人血浆、脂肪组织和粪便样本中21种类固醇进行定量测定
Ilia Evstafev， Matilda Krakstrom， Niina Saarinen-Aaltonen， Janne Hakkarainen， Merja R. Hakkinen， Seppo Auriola， Peter J Bostrom， Matti Poutanen， Matej Oresic， Alex M. Dickens
bioRxiv 2026.07.08.737297； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.08.737297
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.08.737297v1?rss=1
🏷️ 类固醇定量 UHPLC-MS/MS 靶向代谢组学 血浆分析 脂肪组织 粪便样本