利用天冬酰胺连接酶对P22病毒样颗粒进行选择性高效功能化

蛋白质笼由于其高度有序的结构以及在体内的自组装能力，为纳米尺度工程提供了有用的支架。这些支架适于进行后期偶联修饰，从而实现功能拓展。然而，许多偶联技术要么缺乏位点选择性，要么需要引入非天然氨基酸，或者需要体积庞大的识别基序以促进连接反应。 本文采用一种具有连接酶活性的天冬酰胺内肽酶（AEP），对来源于鼠伤寒沙门氏菌噬菌体P22的病毒样颗粒（VLP）进行高效功能化。研究表明，该酶能够在温和反应条件下，通过对P22衣壳蛋白C末端进行最小程度延伸，将肽和蛋白质偶联到已组装的P22 VLP上。我们进一步提升了该反应的适用性，实现了一锅法双重功能化反应，即在单一步骤中将两个具有治疗相关性的受体靶向结构域偶联至P22 VLP。最后，我们证明了AEP介导的生物偶联有望赋予P22 VLP在体外的受体结合功能。 该研究证明了AEP连接酶作为生物偶联工具的有效性，可用于对VLP这类大型分子组装体进行位点选择性功能化。

蛋白质笼由于其高度有序的结构以及在体内的自组装能力，为纳米尺度工程提供了有用的支架。这些支架适于进行后期偶联修饰，从而实现功能扩展。然而，许多偶联技术要么缺乏位点选择性，要么需要引入非天然氨基酸，或者需要体积较大的识别基序以促进连接反应。在此，采用一种具有连接酶活性的天冬酰胺内肽酶（AEP）对来源于鼠伤寒沙门氏菌噬菌体P22的类病毒颗粒（VLP）进行高效功能化。研究表明，该酶能够在温和反应条件下，通过对P22衣壳蛋白C末端进行最小程度延伸，将肽和蛋白质偶联到已组装的P22 VLP上。我们进一步提升了反应效率，实现了一锅法双重功能化反应，从而可在单一步骤中将两个具有治疗相关性的受体靶向结构域偶联到P22 VLP上。最后，我们证明了AEP介导的生物偶联能够赋予P22 VLP在体外的受体结合功能。该工作表明，AEP连接酶作为生物偶联工具，在对VLP这类大型分子组装体进行位点选择性功能化方面具有良好效能。

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🏷️ 病毒样颗粒 天冬酰胺连接酶 位点选择性修饰 生物偶联 P22衣壳蛋白