- 4 次围观
在天然折叠结构中对蛋白质的多个位点进行精确修饰，为解答分子和细胞层面的生物学问题提供了独特机遇。在此，我们提出一种遗传密码子扩展策略，用于将由两种非天然氨基酸——丙啶酮丙氨酸（acridonylalanine, Acd）和甲基四嗪苯丙氨酸（methyltetrazinyl phenylalanine, Tet）——组成的荧光团-淬灭剂对，位点特异性地整合到在大肠杆菌中表达的蛋白质中。Acd/Tet这一组合无需翻译后标记，并且可通过Tet的生物正交反应或光化学反应关闭淬灭作用，从而便于开展内部对照实验。基于Stern-Volmer淬灭、荧光寿命测量以及“脯氨酸标尺”肽的机制研究，确定了淬灭作用的距离依赖性。作为概念验证，我们将该策略应用于研究：1）钙调蛋白（calmodulin），一种钙感应蛋白；2）RecA，细菌中的DNA损伤感应蛋白；以及3）LexA，一种转录抑制因子，其由RecA介导的激活调控细菌获得性抗生素耐药性。利用这些蛋白质，我们证明，Acd/Tet双重标记能够在分子层面揭示蛋白质动力学，实现高通量药物筛选，并推进蛋白质结构—功能关系研究工具的发展。
用于位点特异性编码可切换内源性荧光团-淬灭剂对以监测蛋白质动态的遗传密码子扩展 | bioRxiv
跳转至主要内容 首页 关于 投稿 提醒 / RSS 搜索该关键词 高级搜索 最新结果
用于位点特异性编码可切换内源性荧光团-淬灭剂对以监测蛋白质动态的遗传密码子扩展
Priyanda Giri， Venkatesh Yarra， Moriah Mathis， Christina Hurley， Chloe Jones， Olivier Ndogo Eteme， Zachary Hostetler， Richard B Cooley， Rahul Kohli， Ryan Mehl， E. James Petersson
doi： https://doi.org/10.64898/2026.06.26.734876
Priyanda Giri 1 宾夕法尼亚大学； 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY 4.0 国际许可协议 公开提供。
返回顶部 上一篇 下一篇
发表于 2026 年 6 月 29 日。 下载 PDF 补充材料 电子邮件
您的电子邮件 *
您的姓名 *
发送至 *
请输入多个地址，每行一个，或以逗号分隔。
您将要通过电子邮件发送以下内容 用于位点特异性编码可切换内源性荧光团-淬灭剂对以监测蛋白质动态的遗传密码子扩展
邮件主题 （您的姓名）已从 bioRxiv 向您转发一个页面
邮件正文 （您的姓名）认为您可能希望查看 bioRxiv 网站上的此页面。
您的个人留言
验证码 此问题用于测试您是否为人工访客，并防止自动垃圾信息提交。
分享
用于位点特异性编码可切换内源性荧光团-淬灭剂对以监测蛋白质动态的遗传密码子扩展
Priyanda Giri， Venkatesh Yarra， Moriah Mathis， Christina Hurley， Chloe Jones， Olivier Ndogo Eteme， Zachary Hostetler， Richard B Cooley， Rahul Kohli， Ryan Mehl， E. James Petersson
bioRxiv 2026.06.26.734876； doi： https://doi.org/10.64898/2026.06.26.734876
分享本文： 复制
引文工具
用于位点特异性编码可切换内源性荧光团-淬灭剂对以监测蛋白质动态的遗传密码子扩展
Priyanda Giri， Venkatesh Yarra， Moriah Mathis， Christina Hurley， Chloe Jones， Olivier Ndogo Eteme， Zachary Hostetler， Richard B Cooley， Rahul Kohli， Ryan Mehl， E. James Petersson
bioRxiv 2026.06.26.734876； doi： https://doi.org/10.64898/2026.06.26.734876
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.26.734876v1?rss=1
🏷️ 遗传密码子扩展 非天然氨基酸 位点特异性标记 荧光淬灭探针 蛋白质动态监测