利用双波长光片和PSF工程化增强双焦面探测的高速体积单分子成像

单分子定位显微镜（SMLM）能够实现纳米尺度成像，但由于背景荧光、光子利用效率低以及点扩散函数（PSF）占据范围较大，在三维（3D）、高速和高密度应用中仍受限制。本文提出单物镜光片显微镜结合PSF工程增强双平面探测（SoLiD-3D），这是一种多功能成像平台，将双波长光片照明与双通道、多配置双平面成像相结合，通过并行采集及PSF工程化探测实现高速体积SMLM。并行化的单物镜光片激发与PSF工程相结合，克服了传统宽场和双平面方法的关键局限。对两种激发波长进行独立控制以实现光学切片，可通过动态位移光片实现体积覆盖，从而在提高对比度和时间分辨率的同时，实现双靶标同步成像与单靶标双通道成像。借助SoLiD-3D，我们展示了高速单靶标与双靶标双通道成像，在不牺牲光子效率的前提下使定位密度翻倍，并通过PSF工程增强的双平面探测实现连续体积成像，用于全细胞3D成像，在更大深度范围内获得更优的轴向定位性能。我们还首次将Hummus PSF（一种紧凑型工程化PSF，可在显著减小空间占用的同时实现高精度3D定位）用于超分辨成像应用，并证明其可进一步提升速度。综上，SoLiD-3D缓解了轴向范围与定位精度之间的权衡，并较传统3D SMLM方法提供了更高的速度。

该网站正在使用安全服务来保护自身免受在线攻击。你刚才执行的操作触发了安全防护机制。可能触发此拦截的操作有多种，包括提交某个特定词语或短语、SQL 命令或格式错误的数据。

你可以发送电子邮件给网站所有者，告知他们你已被拦截。请在邮件中说明该页面出现时你正在进行的操作，并附上本页底部显示的 Cloudflare Ray ID。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.20.733419v1?rss=1

🏷️ 单分子定位显微镜 三维超分辨成像 光片显微镜 PSF工程化 双平面探测 高速体积成像