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噬病毒体是一类双链 DNA 病毒，能够对感染单细胞真核生物的巨型病毒进行超寄生。噬病毒体的寄生通常会降低巨型病毒的复制效率，从而调节环境中的微生物群落。然而，由于方法学上的限制，这种三方关系背后的分子机制在很大程度上仍不清楚。 在本研究中，我们建立了一种针对 Sputnik 噬病毒体的反向遗传学系统。Sputnik 噬病毒体寄生于感染变形虫的巨型病毒——Mimivirus。我们证明，通过转染基因组 DNA 可以恢复具有感染性的噬病毒体颗粒。转染由环形聚合酶延伸反应（CPER）合成的基因组 DNA 同样能够恢复具有感染性的病毒。作为概念验证，我们通过转染由 CPER 组装的突变基因组 DNA，成功修饰了两个 Sputnik 基因。总体而言，我们的反向遗传学系统为评估 Sputnik 基因的功能重要性提供了一个框架，并将促进未来对噬病毒体的遗传学研究。
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🏷️ 噬病毒体 巨型病毒 反向遗传学 基因组DNA转染 CPER组装
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