双管挥发性测定法:一种用于监测对反式氟氯氰菊酯敏感性的非接触式台式生物测定方法

root 提交于 周三, 06/17/2026 - 10:47
引言:自2015年以来,疟疾防控进展已陷入停滞,其中杀虫剂抗性是关键驱动因素之一。空间散发装置将挥发性杀虫剂释放到空气中,使蚊虫通过一种不同于经处理蚊帐、室内滞留喷洒和标准生物测定中所采用的跗节接触途径而暴露。反式氟氯氰菊酯目前采用WHO瓶式生物测定法进行监测,但该方法结合了接触暴露和蒸气暴露,无法分离空气传播效应。因此,亟需一种可扩展的、仅针对蒸气暴露的方法,以表征蚊虫对挥发性拟除虫菊酯的易感性。 方法:我们对WHO管式生物测定法进行了改良,以实现非接触式反式氟氯氰菊酯蒸气暴露,避免蚊虫接触经处理滤纸。未吸血的雌性按蚊暴露于丙酮对照或负载反式氟氯氰菊酯的滤纸,剂量分别为0.005、0.1和2 mg/纸。击倒率在60分钟内记录,死亡率于24小时评估。测试在三个实验室(LSTM、AIRID和KEMRI)开展,使用易感参考品系和抗性实验室品系。采用剂量-反应模型估算半数有效浓度(EC50),分别针对击倒效应(EC50KD)和死亡效应(EC50Mort),并以当地易感参考品系为基准计算抗性比值(RR)。 结果:该测定产生了清晰的浓度依赖性和时间依赖性反应。在LSTM,Kisumu品系的EC50KD为0.052 mg/纸,EC50Mort为0.054 mg/纸;Siaya品系与其相当(RR50KD为1.17,RR50Mort为0.89),而Tiassale 13和KDR品系表现出较低的易感性(RR50KD分别为2.42和2.85;RR50Mort分别为5.56和6.65)。在AIRID,抗性的Cove品系未达到50%的击倒率或死亡率。在KEMRI,Siaya品系表现出较低易感性(RR50KD为3.36,RR50Mort为5.65)。AIRID和KEMRI中的Kisumu品系与LSTM中的结果具有可比性(EC50KD/EC50Mort分别为0.007/0.030和0.044/0.023 mg/纸)。尽管实验室间存在变异,易感品系与抗性品系仍可明确区分。相较于接触型拟除虫菊酯更低的抗性比值提示,基于接触的抗性表型可能无法预测蒸气暴露下的易感性。 结论:该测定法利用标准WHO硬件提供了一种实用的台式方法,能够在三个实验室中区分易感品系与抗性品系。推荐以24小时死亡率作为主要终点,60分钟击倒率作为次要终点。尽管尚未完成验证,该方法为进一步验证及向其他活性成分的适配奠定了基础。

引言:自2015年以来,疟疾防控进展已陷入停滞,其中杀虫剂抗性是关键驱动因素之一。空间散发装置将挥发性杀虫剂释放到空气中,通过不同于经处理蚊帐、室内滞留喷洒和标准生物测定中所采用的跗节接触途径使蚊虫暴露。反式氟氯氰菊酯目前采用WHO瓶式生物测定进行监测,但该方法同时包含接触暴露和蒸气暴露,因而无法分离空气传播效应。为了表征对挥发性拟除虫菊酯的敏感性,亟需一种可扩展的、仅基于蒸气暴露的方法。

方法:我们对WHO管式生物测定进行了改良,以在不接触经处理滤纸的情况下提供非接触式反式氟氯氰菊酯蒸气暴露。未吸血的雌性按蚊暴露于丙酮对照纸或反式氟氯氰菊酯处理纸,剂量分别为0.005、0.1和2 mg/纸。记录60分钟内的击倒情况及24小时后的死亡率。检测在三个实验室(LSTM、AIRID和KEMRI)开展,使用敏感参考品系和抗性实验室品系。采用剂量-反应模型估算EC50;分别针对击倒(EC50KD)和死亡率(EC50Mort)计算,并以当地敏感参考品系为参照计算抗性比值(RR)。

结果:该测定产生了清晰的浓度依赖性和时间依赖性反应。在LSTM,Kisumu品系的EC50KD为0.052 mg/纸,EC50Mort为0.054 mg/纸;Siaya品系与其相当(RR50KD 1.17,RR50Mort 0.89),而Tiassale 13和KDR品系敏感性降低(RR50KD分别为2.42和2.85;RR50Mort分别为5.56和6.65)。在AIRID,抗性Cove品系未达到50%击倒率或死亡率。在KEMRI,Siaya表现出较低敏感性(RR50KD 3.36 / RR50Mort 5.65)。AIRID和KEMRI中的Kisumu品系与LSTM结果相当(EC50KD 0.007 / EC50Mort 0.030;EC50KD 0.044 / EC50Mort 0.023)。尽管实验室间存在差异,敏感品系仍可与抗性品系区分开来。与接触型拟除虫菊酯相比,较低的抗性比值提示,基于接触的表型可能无法预测蒸气暴露敏感性。

结论:该测定利用标准WHO硬件提供了一种实用的台式方法,可在三个实验室中区分敏感品系与抗性品系。推荐以24小时死亡率作为主要终点,60分钟击倒作为次要终点。尽管该方法尚未经过验证,但其为进一步验证及向其他活性成分的适配提供了基础。


📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.12.731863v1?rss=1

🏷️ 疟疾媒介 杀虫剂抗性 反式氟氯氰菊酯 挥发性暴露生物测定 按蚊易感性