将创新转化到临床：用于首次人体试验HVTN144的N332-GT5 HIV疫苗候选物的端到端生物工艺开发与cGMP生产

将理性设计的HIV-1免疫原成功转化为有效疫苗，要求生产平台在满足临床级质量标准的同时保持结构一致性。我们开发并放大了一种稳健且符合cGMP要求的N332-GT5 gp140生产工艺。N332-GT5 gp140是一种以生殖系靶向为设计原则的包膜三聚体，旨在启动广谱中和抗体应答，目前正在HVTN144中开展首次人体研究。以采用Leap-In（ATUM）转座子技术构建的稳定CHO细胞系为起点，我们建立了一个生产克隆，该克隆表现出高滴度表达（>200 mg/L），并在60代群体倍增过程中保持遗传稳定性。该生产工艺可由Ambr250微型生物反应器高效放大至200 L一次性系统，并在多个cGMP批次间实现一致的产品质量。 一种精简的三步纯化策略——亲和捕获、多模式精制和病毒清除——实现了>99%的三聚体纯度，同时保持了四级结构和类天然抗原性。正交LC-MS分析证实了位点特异性糖链占有率与设计规范一致，而稳健的病毒清除能力对模型逆转录病毒分别实现了超过18-log和11-log的降低。通过该平台生产的临床级材料已成功用于HVTN144受试者给药。本研究建立了一种适用于结构复杂HIV-1包膜免疫原的可放大、可重复生产范式，推动了基于生殖系靶向原则的理性疫苗设计领域发展。

将理性设计的 HIV-1 免疫原成功转化为有效疫苗，需要在满足临床级质量标准的同时，采用能够维持结构一致性的生产平台。我们开发并放大了一种稳健且符合 cGMP 要求的 N332-GT5 gp140 生产工艺。N332-GT5 gp140 是一种以生发系靶向为设计理念的包膜三聚体，旨在启动广谱中和抗体反应，目前正在 HVTN144 中开展首次人体试验。以利用 Leap-In（ATUM）转座子技术构建的稳定 CHO 细胞系为起点，我们建立了一个生产克隆，该克隆表现出高滴度表达（>200 mg/L），并在 60 次群体倍增过程中保持遗传稳定性。

该生产工艺可从 Ambr250 微型生物反应器高效放大至 200 L 一次性系统，并在多个 cGMP 批次中实现了一致的产品质量。通过一种简化的三步纯化策略——亲和捕获、多模态精制和病毒清除——获得了 >99% 的三聚体纯度，同时保持了四级结构和类天然抗原性。正交 LC-MS 分析证实了位点特异性聚糖占有率与设计规格一致，而稳健的病毒清除能力对模型逆转录病毒分别实现了超过 18-log 和 11-log 的降低。通过该平台生产的临床级材料已成功用于 HVTN144 的给药。

本研究为结构复杂的 HIV-1 包膜免疫原建立了一种可放大、可重复的生产范式，推动该领域朝着基于生发系靶向原则的理性疫苗设计迈进。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.11.731363v1?rss=1

🏷️ HIV疫苗 生殖系靶向 cGMP生产 CHO细胞表达 三聚体免疫原 生物工艺开发