SKP1/Cul1/F-Box（SCF）复合物是一种E3泛素连接酶，负责将多种蛋白质靶向至26S蛋白酶体进行降解。在该复合物中，多种F-box蛋白（FBPs）通过SKP1衔接蛋白与SCF复合物相连，从而实现对不同底物的识别。 在细胞内寄生虫刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）中，SKP1受氧依赖性调控。在常氧条件下，脯氨酰羟化酶PHYa对SKP1进行羟化修饰，使其为随后由五种SKP1特异性糖基转移酶活性介导的修饰做好准备。糖基化在调控SKP1中发挥重要作用，它既可削弱紧密结合的SKP1同源二聚体，也可影响细胞内与其结合的FBPs谱。然而，无论SKP1的糖基化状态如何，末端SKP1糖基转移酶GAT1始终存在于SKP1相互作用组中，这对于一种酶而言并不寻常。此外，与正常细胞及其他糖基化缺陷突变体相比，gat1敲除细胞中与SKP1结合的FBPs呈现出独特的组成谱。 利用沉降速度分析超速离心技术，我们证明天然GAT1同源二聚体可与SKP1单体形成复合物，其亲和力和化学计量比由其糖基化状态决定。经突变探测验证的计算建模表明，GAT1与FBPs及SKP1同源二聚体所利用的是同一个核心疏水界面，因此二者存在竞争关系。该界面还受到SKP1内在无序C端区域（CTR）提供的可变且短暂的类模糊相互作用的补充，而这些相互作用又反过来受到聚糖的约束。此外，亚化学计量水平的GAT1能够以依赖CTR的方式介导SKP1单体化，这表明GAT1在动力学上具有促进SKP1单体可用性的潜力，并由此影响其在细胞内对FBP结合偏好的选择。
SKP1/Cul1/F-box（SCF）复合物是一种E3泛素连接酶，负责将一系列蛋白质靶向进行26S蛋白酶体降解。在该复合物中，多种F-box蛋白（FBPs）通过SKP1衔接蛋白连接至SCF复合物，从而实现对底物的差异化识别。
在细胞内寄生虫刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）中，SKP1受到氧依赖性的调控。在常氧条件下，脯氨酰羟化酶PHYa对SKP1进行羟化修饰，使其为后续由五种SKP1特异性糖基转移酶活性介导的修饰做好准备。糖基化在调控SKP1中发挥重要作用，其通过削弱紧密结合的SKP1同源二聚体并影响细胞内结合的FBPs谱而发挥作用。
然而，无论SKP1的糖基化状态如何，末端SKP1糖基转移酶GAT1都存在于SKP1相互作用组中，这对于一种酶而言并不寻常。此外，与正常细胞及其他糖基化缺陷突变体相比，gat1敲除细胞中与SKP1结合的FBPs呈现出独特的组成谱。
利用沉降速度分析超速离心法，我们证明天然GAT1同源二聚体可与SKP1单体形成复合物，其亲和力和化学计量比由其糖基状态决定。经突变探测验证的计算建模表明，GAT1与FBPs及SKP1同源二聚体所利用的同一核心疏水界面发生竞争。该界面还受到SKP1本征无序C端区域（CTR）所贡献的可变、瞬时、类似模糊相互作用的补充，而这些相互作用又受到聚糖的限制。
此外，低于化学计量比水平的GAT1能够以CTR依赖的方式介导SKP1单体化，这表明GAT1在动力学上具有促进SKP1单体可利用性的潜力，并进而影响细胞中其对FBP结合偏好的后果。
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.11.731712v1?rss=1
🏷️ 刚地弓形虫 SKP1糖基化 糖基转移酶GAT1 SCF泛素连接酶 蛋白质相互作用 非酶性调控