使用双柱 CaptureSMB 连续捕获重组 AAV 颗粒

重组腺相关病毒（rAAV）因其安全且精准的基因递送能力，在基因治疗中日益受到重视。然而，某些适应症需要显著更高剂量的载体，这使生产能力和生产成本（COG）面临极限挑战。 在本研究中，我们首次提出了一种连续双柱捕获工艺（CaptureSMB），可在无需事先浓缩或预处理的情况下，直接从未经处理的灌流收获液中纯化rAAV5。该方法与传统分批流程存在根本差异；后者通常要求在亲和捕获前进行澄清和浓缩处理。本方法为病毒载体制造提供了一种新的工艺集成策略。我们首先开发了单柱分批捕获工艺，随后将其与连续CaptureSMB构型进行了比较。经优化的CaptureSMB运行在四个循环中实现了稳定一致的收率，其回收率高于分批操作（+14.3%），同时具有更高的生产率（+11.4%）和更低的缓冲液消耗（-79.2%）。关键质量属性分析显示，在CaptureSMB早期循环中，宿主细胞蛋白水平和残留DNA水平均更低，而rAAV5颗粒的满衣壳比例、热稳定性和转导效率在各循环及不同工艺模式之间均保持不变。 这些发现表明，直接从灌流收获液进行连续双柱CaptureSMB捕获不仅能够提高收率和制造效率，还能够维持产品质量，并在某些方面提升产品质量。这一新策略为应对rAAV基因治疗生产中的制造能力和成本挑战提供了一条前景良好的途径。

重组腺相关病毒（rAAV）由于其安全且精准的基因递送能力，在基因治疗中日益凸显其重要性。然而，某些适应症需要显著更高的载体剂量，这使生产能力和生产成本（COG）逼近极限。

在本研究中，我们首次提出了一种连续双柱捕获工艺（CaptureSMB），可直接从未经任何预浓缩或预处理的灌流收获液中纯化rAAV5。该方法与传统分批工艺有根本性区别；后者通常要求在亲和捕获之前进行澄清和浓缩处理。本研究提出了病毒载体生产中的一种新型工艺集成策略。首先开发了单柱分批捕获工艺，随后将其与连续CaptureSMB构型进行了比较。

优化后的CaptureSMB运行在四个循环中实现了稳定一致的产率，其回收率高于分批操作（+14.3%），同时具有更高的生产效率（+11.4%）和更低的缓冲液消耗（-79.2%）。关键质量属性分析表明，在CaptureSMB早期循环中，宿主细胞蛋白水平和残留DNA水平均更低，而rAAV5颗粒的实心衣壳比例、热稳定性和转导效率在各循环及不同工艺模式下均保持不变。

这些结果表明，直接从灌流收获液进行连续双柱CaptureSMB捕获不仅能够提高产率和制造效率，还能够维持产品质量，并在某些方面提升产品质量。这一新策略为应对rAAV基因治疗生产中的制造能力和成本挑战提供了一条有前景的路径。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.12.731701v1?rss=1

🏷️ 重组腺相关病毒 连续捕获工艺 CaptureSMB 病毒载体纯化 基因治疗生产 灌流收获液