解锁病毒逃逸机制：BoHV-1 UL49.5腔内电荷相互作用以变构方式调控TAP降解

牛α疱疹病毒1型（BoHV-1）的UL49.5蛋白已知可抑制抗原加工相关转运体（TAP）并干扰抗原呈递，这一作用部分是通过促进TAP降解实现的。然而，N端腔内结构域中的静电相互作用在调控这些过程中的作用仍不清楚。在本研究中，我们结合圆二色性（CD）、溶液核磁共振波谱（NMR）、全原子分子动力学模拟以及基于细胞的实验，界定了UL49.5的N端腔内结构域内带电残基的结构与功能贡献。我们设计了UL49.5的两个N端变体，即UL49.522-56RR(30-31)DD和UL49.522-56D36K，它们分别含有电荷反转型氨基酸残基替换。 这两个突变体均形成了由膜诱导的α螺旋结构，但其螺旋稳定性和相互作用模式发生了改变。对UL49.5-TAP复合物的分子动力学模拟显示，野生型UL49.5与TAP形成稳定的静电界面，尤其是在非折 kink 构象中更为显著；而电荷反转突变则重塑了盐桥网络，削弱了腔内螺旋的稳定性，并改变了跨膜区及胞质C端区域的定位和动力学行为。N端内部的这些结构变化会改变KLHDC3依赖性降解所必需的C端降解子（degron）的暴露状态。与这些发现一致，尽管这些突变体仍保持了接近野生型水平的MHC I类分子下调能力，但它们无法诱导TAP发生蛋白酶体降解。 综上，这些结果表明，N端静电相互作用是UL49.5介导TAP降解的变构决定因素，并证明TAP降解在机制上可以与MHC I类分子下调相分离。本研究增进了我们对病毒免疫逃逸策略及其潜在治疗靶点的理解。

牛α疱疹病毒1型（BoHV-1）的UL49.5蛋白已知可抑制抗原加工相关转运体（TAP）并干扰抗原呈递，这一作用部分是通过促进TAP降解实现的。然而，N端腔面结构域内静电相互作用在调控这些过程中的作用仍不清楚。在本研究中，我们结合圆二色谱（CD）、溶液核磁共振波谱（NMR）、全原子分子动力学模拟和基于细胞的实验，界定了UL49.5的N端腔面结构域中带电残基的结构与功能贡献。我们设计了UL49.5的两个N端变体，即UL49.5^22-56RR(30-31)DD和UL49.5^22-56D36K，它们分别包含电荷反转氨基酸残基替换。这两个突变体均形成了由膜诱导的α螺旋结构，但其螺旋稳定性和相互作用模式发生了改变。对UL49.5-TAP复合物的分子动力学模拟显示，野生型UL49.5与TAP形成稳定的静电界面，尤其是在无弯折构象中，而电荷反转突变会重塑盐桥网络、降低腔面螺旋的稳定性，并改变跨膜区和胞质C端区域的定位与动力学行为。N端内部的这些结构变化改变了KLHDC3依赖性降解所必需的C端降解子（degron）的暴露状态。与这些发现一致，尽管这些突变体仍保持了接近野生型水平的MHC I类分子下调能力，但它们并不能诱导TAP发生蛋白酶体降解。综上，这些结果表明，N端静电相互作用是UL49.5介导TAP降解的变构决定因素，并证明TAP降解在机制上可与MHC I类分子的下调相分离。本研究增进了我们对病毒免疫逃逸策略及潜在治疗靶点的理解。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.11.731699v1?rss=1

🏷️ 病毒免疫逃逸 TAP降解 UL49.5蛋白 抗原呈递抑制 变构调控 电荷相互作用