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常规1型树突状细胞（cDC1）专门负责交叉呈递和白细胞介素-12的产生，对于抵御细胞内病原体和肿瘤的免疫至关重要，但其在体内仍然十分稀少，从而限制了机制研究和转化研究。现有的骨髓来源树突状细胞（BMDC）方法既无法实现对cDC1的高选择性富集，也无法实现高纯度的可扩增生产。在此，我们建立了一种新型体外培养体系，利用限定培养基条件并联合重组FLT3L、GM-CSF和Kit配体（KitL），从小鼠骨髓中选择性生成CD103 cDC1，命名为iDC1。iDC1培养体系可实现可扩增生成，估计从单只小鼠可获得1.5 × 10^9个CD103 cDC1，纯度高于95%，与既往基于重组细胞因子的方法相比，产量至少提高了75倍。表型和转录分析表明，iDC1与CD103 cDC1谱系高度一致，同时与巨噬细胞群体保持明显区别。在功能上，iDC1对先天性刺激表现出强烈应答，能够产生白细胞介素-12和炎性趋化因子，并高效地将细胞相关抗原交叉呈递给CD8 T细胞。从机制上看，KitL和GM-CSF调控cDC1生成的不同阶段，而蛋白质组学、磷酸化蛋白质组学及功能分析表明，GM-CSF通过抑制细胞凋亡和氧化应激并促进cDC1增殖而发挥作用。iDC1的生成依赖于真实cDC1发育所必需的+32 kb Irf8增强子，同时鉴定出与STAT5和BRD4相关的调控程序是高效iDC1生成的重要调节因子。总之，这些发现确立了iDC1培养体系作为研究cDC1生物学及开发基于cDC1的免疫治疗策略的可扩增平台。
常规1型树突状细胞（cDC1）专门介导交叉呈递和白细胞介素-12的产生，并且对抵御细胞内病原体和肿瘤的免疫至关重要，但其在体内仍然十分稀少，从而限制了机制研究和转化研究。现有的骨髓来源树突状细胞（BMDC）方法既无法实现对cDC1的高选择性富集，也无法实现高纯度的规模化制备。在此，我们建立了一种新型体外培养体系，在限定培养基条件下联合使用重组FLT3L、GM-CSF和Kit配体（KitL），从小鼠骨髓中选择性生成CD103 cDC1，命名为iDC1。iDC1培养体系可实现规模化生成，估计从单只小鼠中可获得1.5 × 10^9个CD103 cDC1，纯度高于95%，相较于先前基于重组细胞因子的方法，至少提高了75倍。
表型和转录分析表明，iDC1与CD103 cDC1谱系高度一致，同时与巨噬细胞群体保持明确区别。在功能上，iDC1对先天性刺激表现出强烈应答，能够产生白细胞介素-12和炎性趋化因子，并高效地将细胞相关抗原交叉呈递给CD8 T细胞。在机制方面，KitL和GM-CSF调控cDC1生成的不同阶段，而蛋白质组学、磷酸化蛋白质组学及功能分析表明，GM-CSF在促进cDC1增殖的同时抑制细胞凋亡和氧化应激。iDC1的生成依赖于Irf8基因+32 kb增强子，该增强子是真正cDC1发育所必需的；此外，还鉴定出与STAT5和BRD4相关的调控程序是高效生成iDC1的重要调节因子。总之，这些发现确立了iDC1培养体系作为研究cDC1生物学及开发基于cDC1的免疫治疗策略的可规模化平台。
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.04.730212v1?rss=1
🏷️ 树突状细胞 cDC1 体外培养体系 抗原交叉呈递 GM-CSF 免疫治疗