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激光相位板(laser phase plate, LPP)可在冷冻电子显微镜(cryoEM)中实现相位衬度成像,在不损害高分辨率信息的情况下增强图像对比度。本文报告了一种交叉激光相位板(crossed laser phase plate, xLPP)的实现,该装置由两个相互正交取向的光学腔组成,并安装于一台配备新设计传递透镜模块的 ThermoFisher Scientific Krios G4 显微镜中。我们证明了预期的强对比度增强以及稳定、可加的 90° 相移,其对比度传递函数(CTF)与理论高度一致。对标准基准样品去辅基铁蛋白(apoferritin)的单颗粒分析(SPA)达到了 1.79 Å 的分辨率,表明该系统具备采集高分辨率 cryoEM 数据的能力。在对较厚的大肠杆菌细胞(约 350 nm)成像时,xLPP 可增强对比度并提高低频模板匹配信号。综上,这些结果确立了 xLPP 的可行性,并凸显了其在生物系统高对比度、高分辨率 cryoEM 成像中的潜力。
激光相位板(LPP)可在冷冻电子显微镜(cryoEM)中实现相位衬度成像,在不损害高分辨率信息的前提下增强图像对比度。本文报告了一种交叉激光相位板(xLPP)的实现,该装置由两个相互正交取向的光学腔组成,并安装于一台配备新设计传输透镜模块的 ThermoFisher Scientific Krios G4 显微镜中。我们证明了预期的显著对比度增强以及稳定、可叠加的 90° 相移,其对比传递函数(CTF)与理论高度一致。以标准基准样品去辅基铁蛋白(apoferritin)进行单颗粒分析(SPA)获得了 1.79 Å 的分辨率,表明该系统具备采集高分辨率 cryoEM 数据的能力。在对较厚的大肠杆菌细胞(约 350 nm)成像时,xLPP 可增强对比度并提高低频模板匹配信号。综上,这些结果确立了 xLPP 的可行性,并凸显了其在生物体系高对比度、高分辨率 cryoEM 成像中的潜力。
📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.05.730245v1?rss=1
🏷️ 冷冻电镜 激光相位板 相位衬度成像 单颗粒分析 高分辨率结构解析 电子显微镜仪器
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