哺乳动物脑内致病性 UGA 终止密码子的可编程修复

由 UGA 终止密码子导致的蛋白截短变异是神经发育疾病中最常见的一类罕见变异突变。抑制型转运 RNA（suppressor transfer RNA，sup-tRNA）在修复提前终止密码子（premature termination codon，PTC）方面具有治疗潜力，但迄今为止，传统 AAV 递送平台的表现欠佳，而缺乏能够无创评估其在哺乳动物脑内体内活性的方法也阻碍了该领域的发展。为填补这一技术空白，我们利用来自荧光素酶-UGA 小鼠模型的经颅体内生物发光成像数据，以实现载荷优化。这些数据表明，U6 启动子和 AAV2/9 衣壳的体内活性最低；相反，采用自互补 AAV2/9、并将 tRNA 置于最小 100 bp 基因组背景中的策略，可实现广泛且有效的 PTC 修复。此外，载荷中 tRNA 的多重组合以及 tRNA 内含子的使用，使低病毒滴度条件下仍能保持疗效并实现持久修复。对脑内递送的 scAAV-ArgUGA sup-tRNA 进行 tRNA 测序表明，其对内源性 tRNA 水平、氨酰化或加工均无影响，而这些特征在 scAAV 递送的 ArgUGA sup-tRNA 中同样得以维持。总体而言，本研究界定了一种可扩展的、针对 UGA 终止密码子抑制的精准策略，为在哺乳动物脑中开发持久性的神经发育障碍遗传修复疗法提供了支持。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.13.724978v1?rss=1

🏷️ 提前终止密码子修复 抑制型tRNA AAV递送 脑内基因治疗 神经发育疾病