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准确测定药物抗体比（DAR）对于抗体偶联药物（ADC）的开发、质量控制和性能评估至关重要；然而，传统分析方法通常需要繁琐的样品前处理、较长的分析时间以及大量样品消耗。由于固有的糖基化异质性和可变的药物偶联程度，完整ADC的峰分布极其复杂。通过酶促消化，ADC可转化为更小的亚基或去糖基化物种，从而显著简化质谱图谱。这种结构异质性的降低有助于更清晰的峰指认，并实现更准确、可靠的DAR定量。 在此，我们报道了一种用于ADC快速DAR表征的超快速微液滴消化质谱策略。抗体和ADC的微液滴酶促消化在喷雾电离过程中于微秒时间尺度内完成，从而能够以最少的样品前处理实现直接在线亚基分析。该方法采用与ADC模拟物偶联的NIST单克隆抗体（mAb）进行了验证，这些ADC模拟物覆盖了从低到高DAR（0至14）范围；同时还验证了具有复杂糖基化的西妥昔单抗来源ADC模拟物（DAR：5）以及商业化ADC Kadcyla（DAR：3.5）。在多种酶促流程（IdeS、EndoS2和EndoF3）中均获得了一致的DAR数值，并表现出良好的重复性（%CV通常利用超快速微液滴消化技术快速测定抗体药物偶联物中的药物/抗体比 | bioRxiv
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利用超快速微液滴消化技术快速测定抗体药物偶联物中的药物/抗体比
Yongqing Yang， Juana Perez Sancheza， Timothy Yaroshuk， Md Tanim Al Hassan， Praneeth Ivan Joel FNU， Thomas Walker， Jim Lau， Mike Knierman， Hui Zhao， Xi Qiu， Karen Luo， Harsha P. Gunawardena， Munkhtsetseg Baatar， Hao Chen
doi： https://doi.org/10.64898/2026.06.02.729562
Yongqing Yang 1 新泽西理工学院； 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 保留所有权利。未经许可不得转载使用。
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发布于 2026 年 6 月 5 日。
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Yongqing Yang， Juana Perez Sancheza， Timothy Yaroshuk， Md Tanim Al Hassan， Praneeth Ivan Joel FNU， Thomas Walker， Jim Lau， Mike Knierman， Hui Zhao， Xi Qiu， Karen Luo， Harsha P. Gunawardena， Munkhtsetseg Baatar， Hao Chen
bioRxiv 2026.06.02.729562； doi： https://doi.org/10.64898/2026.06.02.729562
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利用超快速微液滴消化技术快速测定抗体药物偶联物中的药物/抗体比
Yongqing Yang， Juana Perez Sancheza， Timothy Yaroshuk， Md Tanim Al Hassan， Praneeth Ivan Joel FNU， Thomas Walker， Jim Lau， Mike Knierman， Hui Zhao， Xi Qiu， Karen Luo， Harsha P. Gunawardena， Munkhtsetseg Baatar， Hao Chen
bioRxiv 2026.06.02.729562； doi： https://doi.org/10.64898/2026.06.02.729562
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.06.02.729562v1?rss=1
🏷️ 抗体偶联药物 药物抗体比 微液滴消化 质谱分析 高通量表征