QuadCleave：DNA G-四链体的酶切与分析

G-四链体（G4）是含有鸟嘌呤四聚体的非经典DNA二级结构，对癌症、神经退行性疾病及其他遗传疾病具有深远意义；然而，其预测结果需要通过依赖仪器的实验方法加以验证，包括圆二色（CD）光谱、荧光检测、核磁共振（NMR）或晶体学。我们报道了一种新型、低成本、高效且可扩展的双酶体系，用于确认G4形成及拷贝数重复次数。首先是QuadCleave，其中采用错配核酸内切酶I，对仅含G4形成序列的寡脱氧核苷酸进行可重复、位点特异且选择性的切割。其次，HaeIII酶可鉴定同时也能形成GG/CC碱基对的G4形成序列，而某一序列可被两者共同切割，则据此在C9ORF72中确立该序列；C9ORF72是肌萎缩侧索硬化症（ALS）和额颞叶痴呆（FTD）中突变最为频繁的基因。这些发现确立了一种普遍可及的实验验证方法，用于验证G4形成序列及评估其拷贝数重复，尤其适用于C9ORF72寡脱氧核苷酸；其重复扩增在部分ALS和FTD患者中具有关键的临床意义。

该研究已向美国专利商标局（USPTO）提交专利申请，申请号为美国专利申请第63/966,755号。

感谢您关注并帮助传播bioRxiv的信息。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.15.725486v1?rss=1

🏷️ DNA G-四链体 酶切检测 C9orf72重复扩增 ALS/FTD 核酸二级结构