K-ras抑制剂RMC-6236对胶质母细胞瘤的放射增敏作用|||北京沫之东生物技术有限公司

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目的：胶质母细胞瘤（GBM）以临床预后差和对放射治疗显著耐受为特征。由于GBM有效的放射增敏策略仍然有限，我们研究了抑制KRAS/RAS信号是否能够增强GBM对放射的应答。具体而言，我们评估了RMC-6236的放射增敏潜力；RMC-6236是一种RAS(ON)多选择性抑制剂，能够在多种RAS依赖状态下抑制活性RAS信号。实验设计：采用人GBM细胞系（U251、LN-18、ACPK1和OSU61）接受放射处理，并分别设置有或无遗传学或药理学KRAS抑制的条件。KRAS信号通过siRNA介导的敲低或RMC-6236处理加以抑制。采用Raf-RBD pull-down实验和免疫印迹检测放射诱导的KRAS活化及其下游MAPK信号。采用克隆形成存活实验评估放射敏感性。分别通过γ-H2AX免疫荧光、流式细胞术和细胞核形态学评估分析DNA损伤持续性、细胞周期分布和有丝分裂灾难。在体治疗效果则在原位U251异种移植模型中进行评估。结果：放射在GBM细胞中诱导KRAS发生短暂活化并增加KRAS蛋白表达，同时伴随ERK、JNK和p38信号通路的激活。siKRAS抑制了放射诱导的KRAS和MAPK活化，并在全部4种GBM细胞系中显著增强了放射敏感性。同样，RMC-6236抑制了放射诱导的KRAS活化，并减弱了下游MAPK信号，而不降低KRAS总蛋白表达。RMC-6236在所有GBM细胞系中均显著提高了放射敏感性，剂量增敏因子范围为1.33–1.46。从机制上看，RMC-6236与放射联合处理增加了持续存在的γ-H2AX焦点，并增强了有丝分裂灾难，但未导致细胞稳定一致地重新分布至放射敏感性更高的细胞周期阶段。在原位GBM模型中，与对照组和单纯放疗组相比，RMC-6236与放射联合治疗显著延长了生存期。结论：这些发现表明，放射诱导的KRAS信号是GBM放射抗性的一个具有功能重要性的介导因素，并证明抑制KRAS/RAS信号可在体外和体内增强放射应答。RMC-6236通过抑制适应性RAS/MAPK信号，并促进照射后持续性DNA损伤和有丝分裂灾难，可能成为GBM一种有前景的放射增敏策略。然而，仍有必要对这一联合方案开展临床试验。

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目的：胶质母细胞瘤（GBM）具有较差的临床结局，并对放射治疗表现出显著耐受性。由于针对 GBM 的有效放射增敏策略仍然有限，我们研究了抑制 KRAS/RAS 信号通路是否能够增强 GBM 对放射的应答。具体而言，我们评估了 RMC-6236 的放射增敏潜力；RMC-6236 是一种 RAS（ON）多选择性抑制剂，可在多种 RAS 依赖状态下抑制活性 RAS 信号。

实验设计：将人 GBM 细胞系（U251、LN-18、ACPK1 和 OSU61）给予放射处理，并分别设置有无遗传性或药理性 KRAS 抑制的条件。KRAS 信号通过 siRNA 介导的敲低或 RMC-6236 处理加以抑制。采用 Raf-RBD pull-down 检测和免疫印迹分析评估放射诱导的 KRAS 激活及其下游 MAPK 信号。采用克隆形成存活实验评估放射敏感性。分别通过 γ-H2AX 免疫荧光、流式细胞术和细胞核形态学评估分析 DNA 损伤持续、细胞周期分布和有丝分裂灾难。体内治疗效果则在原位 U251 异种移植模型中进行检验。

结果：放射在 GBM 细胞中诱导 KRAS 的一过性激活以及 KRAS 蛋白表达增加，并伴随 ERK、JNK 和 p38 信号通路的激活。siKRAS 抑制了放射诱导的 KRAS 和 MAPK 激活，并在全部四种 GBM 细胞系中显著增强了放射敏感性。同样，RMC-6236 抑制了放射诱导的 KRAS 激活，并减弱了下游 MAPK 信号，而不降低 KRAS 总蛋白表达。RMC-6236 在所有 GBM 细胞系中均显著提高了放射敏感性，剂量增强因子范围为 1.33 至 1.46。从机制上看，RMC-6236 与放射联合处理增加了持续存在的 γ-H2AX 焦点，并增强了有丝分裂灾难，但并未一致性地促使细胞重新分布至放射敏感的细胞周期阶段。在原位 GBM 模型中，RMC-6236 与放射联合治疗与对照组及单纯放射组相比，显著延长了生存期。

结论：这些发现表明，放射诱导的 KRAS 信号是 GBM 放射耐受中具有功能重要性的介导因素，并证明抑制 KRAS/RAS 信号可在体外和体内增强放射应答。RMC-6236 通过抑制适应性 RAS/MAPK 信号，并促进照射后持续性 DNA 损伤和有丝分裂灾难，可能成为一种有前景的 GBM 放射增敏策略。然而，仍有必要开展这一联合方案的临床试验。

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发表于 2026 年 6 月 2 日。

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