TSG通过上调窦状卵泡中颗粒细胞CYP19A1的表达抑制炎症反应缓解大鼠多囊卵巢综合征样特征

目的 为了探讨2,3,5,4"-四羟基二苯基-2-O-β-葡萄糖苷（TSG）是否通过抑制炎症改善多囊卵巢综合征（PCOS）样特征。方法 皮下注射脱氢表雄酮建立雌性SD大鼠PCOS模型，然后腹腔注射TSG。颗粒细胞（GCs）KGN转染小分子干扰RNAs（si-NC和si-CYP19A1）后，先用脂多糖（LPS）预孵育，再用（/不用）TSG处理。阴道脱落细胞监测发情周期；苏木精-伊红（HE）染色分析卵巢卵泡形态；酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测血清雌二醇（E2）、睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、晚期糖基化终末产物（AGEs）、C反应蛋白（CRP）、网膜素1（Omentin-1）水平；免疫组化法检测GCs中增殖细胞核抗原（PCNA）和芳香化酶（CYP19A1）的表达；原位末端标记（Tunel）染色检测GCs的凋亡情况；采用实时定量PCR（qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot）检测卵巢和转染细胞的CYP19A1表达；qPCR分析LPS和TSG处理后转染细胞中IL-6和TNF-α的表达。结果 TSG治疗的PCOS鼠恢复了动情周期。与PCOS相比，TSG治疗的PCOS鼠卵巢中窦状卵泡减少，黄体增多。与PCOS相比，TSG处理的PCOS鼠E2升高，T和LH降低；促炎因子（IL-6、TNF-α、CRP、AGEs）降低，抗炎因子（Omentin-1）升高。TSG能部分抑制PCOS引起的PCNA阳性GCs的减少和Tunel阳性GCs的增加。与PCOS相比，经TSG处理后GCs的CYP19A1表达上调。转染si-CYP19A1的细胞中IL-6和TNF-α表达量与si-NC细胞比明显增加。转染细胞经LPS预孵育后，IL-6和TNF-α的表达明显增加，CYP19A1表达下调。与经LPS孵育的细胞相比，经LPS和TSG处理后，细胞IL-6和TNF-α表达量减少，而CYP19A1表达增加。与LPS和TSG处理转染si-NC细胞相比，转染si-CYP19A1的细胞经LPS和TSG处理后，IL-6和TNF-α表达量明显增加。结论 TSG通过上调GCs中CYP19A1的表达抑制炎症反应来缓解PCOS样特征。