Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化

目的 Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂（DSB）的非同源端连接（NHEJ）修复，有报道称其具有RNA结合功能，本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法 利用RNA免疫共沉淀（RIP）测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA；蛋白质印迹法（Western blot，WB）结合定量反转录PCR（qRT-PCR）检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系；生物膜干涉技术（BLI）实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力；电泳迁移率变动分析（EMSA）实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性；形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化；免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒（ZIKV）感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果 研究发现，Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性，并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调，其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞（hNPCs）和人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中敲低Ku70可促进 miR-124的成熟，从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现，ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达，导致细胞形态的分化。结论 本研究揭示了Ku70的一种新功能，即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化，并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。