Y染色体短串联重复序列微流控芯片复合扩增检测体系研究

目的 构建Y染色体短串联重复序列（Y-STR）微流控芯片扩增检测试剂，并进行性能验证，实现Y-STR基因座的快速全集成检测。方法 使用Y-STR微流控芯片检测体系，对其灵敏度、成功率和分型准确率、峰平衡性、精准性和准确性、检材适应性、混合物检测能力和抗抑制性进行验证评估。结果 DNA标准品9948的模板量≥8 ng，血卡片数≥3片以及口腔拭子刮擦次数≥7次时可获得Y-STR完整分型；165份样本的全集成检测成功率为91.52%，分型准确率为99.74%；不同荧光通道之间的峰高比值为89.81%；10次运行的等位基因分型标准品的片段大小标准差均在0.5 bp以内，20份样本全集成检测的等位基因片段和相应的等位基因标准品之间的片段准确性均在0.5 bp以内；能够对口腔拭子、血卡、唾液卡、烟蒂、血棉签、布片精斑等检材进行准确分型；混合样本中较小贡献者与较大贡献者在1∶3的比例时可获得完整基因分型；在不同浓度的腐殖酸（50~ 400 mg/L）、靛蓝（20~100 nmol/L）、血红蛋白（100~500 μmol/L）等抑制物的干扰下，该体系可获得完整基因分型。结论 该体系可应用于国产Quick TargSeq法医DNA现场快速检测系统使用，可在法医学实践中选用。