基于头发蛋白质组学区分个人特质的方法学探究

目的 头发是一类重要的皮肤附属物，主要由角蛋白和角蛋白相关蛋白等组成。不同种族及性别样本的头发蛋白质组成和占比存在差异，且目前缺乏高效率提取头发蛋白的方法。本文探究基于定量头发蛋白质组学方法，旨在探索该方法区分不同个体的可能性。方法 以3例头发样本，对样品处理方法和裂解缓冲液进行探究，发展一种名为PLEE（PTM lab for protein extraction from hair with high efficiency）的稳定、高效的头发蛋白质提取方法，对7例人发样本，以PLEE法进行提取，结合胶内消化方法进行蛋白质组学实验，产出蛋白质组学数据，分析个体间的头发蛋白质组成及占比。结果 共鉴定274种蛋白质，共有的蛋白质107种，非共有蛋白质种类在57~119，部分样本存在独特鉴定蛋白。使用共鉴定107种蛋白质进行定量蛋白质组分析，通过聚类和主成分分析，可将各样本进行区分，且技术重复样本可聚在一起，表明流程的稳定性。另外，筛选出10个关键蛋白（KRT33A、KRTAP9-6、KRT83、KRTAP7-1、KRT32、BLMH、KRT38、KRTAP11-1、NPAS1、KRTAP4-3）在不同个体之间差异比较大且在同个体中蛋白质鉴定稳定。结论 不同个体的头发蛋白质组成存在差异，筛选出的10个蛋白质有望作为区分个体特质的关键蛋白，在个体识别、刑侦方面具有重大的应用潜力。