四氯虫酰胺对斑马鱼急性毒性及黑色素合成的影响

基于四氯虫酰胺生态风险评估，本研究采用超高效液相色谱-串联质谱法测定四氯虫酰胺在水中暴露96 h浓度的变化情况；参照OECD标准，以斑马鱼（<i<Danio rerio</i<）为研究对象，通过静态染毒观察药剂对斑马鱼生长发育影响，统计自主运动、黑色素和体长等指标，通过死亡率计算得到暴露96 h的LC<sub<50</sub<；采用RT-qPCR的方法研究四氯虫酰胺对斑马鱼胚胎黑色素合成相关基因的影响。结果表明：四氯虫酰胺在水中暴露96 h的最高降解率为7.6%，浓度大于80%，在水中暴露96 h的稳定性良好；四氯虫酰胺对斑马鱼胚胎的暴露96 h的LC<sub<50</sub<为23.775 mg·L<sup<−1</sup<，属于低毒范畴；四氯虫酰胺暴露影响斑马鱼胚胎发育，主要表现：一是随着四氯虫酰胺浓度的升高斑马鱼胚胎自主运动频率增加，其中暴露浓度为39.8 mg·L<sup<−1</sup<时，斑马鱼胚胎自主运动频率达到5.5 次·min<sup<−1</sup<，为对照自主运动频率的22倍；二是孵化率降低，暴露浓度在27.65 mg·L<sup<−1</sup<时，斑马鱼胚胎孵化率下降75%；三是体长缩短，暴露浓度为39.8 mg·L<sup<−1</sup<，斑马鱼体长较对照减少了32.27%。暴露后，黑色素沉着下降，暴露96 h斑马鱼胚胎黑色素面积随着四氯虫酰胺暴露浓度的增加明显减少，与空白相比，最高暴露浓度39.8 mg·L<sup<−1</sup<时黑色素面积减少了65%。RT-qPCR结果表明，发现黑色素合成相关基因酪氨酸酶基因（<i<Tyr</i<），SRY-box 转录因子10 （<i<Sox10</i<），酪氨酸酶相关蛋白1 （<i<Trp-1a）</i<，调节小眼症相关转录因子（<i<Mitfa</i<）有一定的变化。本研究结果表明， 四氯虫酰胺通过抑制<i<Sox10</i<以及<i<Mitfa</i<的表达，使得酪氨酸酶相关转录因子<i<Tyr</i<和<i<Tyr-1a</i<等表达异常，最终导致斑马鱼胚胎黑色素合成以及沉着行为受到损害。