荧光活性染料DiO标记腹腔巨噬细胞的示踪与应用研究

目的 以细胞膜绿色荧光活性染料DiO (DiOC₁₈(3)) 标记腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophage），探讨在巨噬细胞消失反应（macrophage disappearance reaction，MDR）中腹腔巨噬细胞的示踪研究。方法 DiO标记腹腔巨噬细胞，过继移植给C57BL/6小鼠；以脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导体内MDR。采用荧光显微镜和流式细胞术检测DiO标记的腹腔巨噬细胞数量及荧光强度；分离收集小鼠的各组织，进行冰冻切片，检测DiO标记的腹腔巨噬细胞分布情况。结果 荧光显微镜和流式细胞仪观察发现，腹腔注射LPS能显著降低腹腔中DiO标记的腹腔巨噬细胞数量及荧光强度。在MDR过程中消失的腹腔巨噬细胞，通过冰冻切片发现在肝脏、胸腺及脾脏中有分布。结论 DiO标记对腹腔巨噬细胞的存活无影响且能长效保持荧光，是一种安全、有效的示踪腹腔巨噬细胞分布的技术手段。