PLA2R-IgG间接荧光定量免疫层析分析的构建与应用

目的 血清抗磷脂酶A2受体抗体IgG（PLA2R-IgG）水平是诊断和治疗特发性膜性肾病（IMN）的重要依据，而目前国内外常规检测手段主要是酶免法。为提升检测的便捷性，同时满足灵敏、宽量程分析需求，本研究构建了一种新的PLA2R-IgG检测技术。方法 采用包裹铕元素的微球示踪，对反应步骤进行选择，对微球制备液的pH、微球-抗体反应比例和反应时间优化，本文基于间接法构建了PLA2R-IgG的荧光定量免疫层析检测方法，并进行了初步临床评价。结果 本方法的灵敏度达0.7 RU/ml，标准曲线方程为y=0.771x-1.437，相关系数0.995，线性测量范围为0.7~1 500 RU/ml，回收率为86.27%~98.98%，平均批内变异系数为8.13%，交叉反应率均小于0.1%，试剂37℃储存10 d稳定。本方法与市售酶免试剂盒相关性为0.953，阴阳性判断一致，对IMN的检出率为76.9%。结论 采用两步法反应的PLA2R-IgG间接荧光定量免疫层析分析，快速、灵敏、准确，具有临床实用性。