烟碱型乙酰胆碱受体4亚基双点突变体的制备及其功能研究

在烟碱型乙酰胆碱受体家族中，含<i<α</i<6亚型的受体是比较特殊的一类。研究发现<i<α</i<6<i<β</i<4*亚型(*表示含其他亚基)在神经系统方面具有一定的调节作用，与神经性疼痛、成瘾等多种疾病的发病机制密切相关，可作为潜在的治疗靶点。比对大鼠与人类<i<α</i<6和<i<β</i<4亚基的序列，以野生型基因为模板，采用基因定点突变的方式，成功得到3种相邻位点突变的<i<α</i<6/<i<α</i<3<i<β</i<4受体突变型基因。通过体外转录、显微注射等手段，构建<i<α</i<6/<i<α</i<3<i<β</i<4受体野生型和突变型在非洲爪蟾卵母细胞上的表达模型，并使用双电极电压钳检测受体的表达情况。结果表明，与野生型受体相比，突变体<i<α6/α3β4</i<[S52N, I53V] 对ACh的敏感性有所提升，<i<EC</i<<sub<50</sub<为59.58 μmol·L<sup<−1</sup<，是野生型的1/2，而其他两种突变体的敏感性与野生型相同。