根癌农杆菌介导的新暗色柱节孢菌遗传转化

火龙果是一种新兴的热带水果，随着种植面积的不断增大，病害问题日趋严重，其中危害最大的是火龙果溃疡病，导致火龙果溃疡病的病原菌为新暗色柱节孢菌（<i<Neoscytalidium dimidiatum</i<）。为了研究新暗色柱节孢菌的遗传变异与基因功能，必须建立有效的遗传转化体系，但目前国内外未见相关报道。本研究通过构建含有<i<gpdA</i<启动子、绿色荧光蛋白（green fluorescent protein）和潮霉素（Hygromycin）抗性基因为筛选标记的双元表达载体，对新暗色柱节孢菌的孢子进行根癌农杆菌介导的遗传转化，成功获得了阳性转化子。通过荧光显微镜观察表明，阳性转化子菌丝能够产生绿色荧光，野生型菌丝不能产生绿色荧光；PCR检测证明了转化子基因组中整合了潮霉素抗性基因。因此，本研究成功实现了根癌农杆菌介导下绿色荧光蛋白基因在新暗色柱节孢菌中的稳定遗传表达，为研究新暗色柱节孢菌对火龙果溃疡病的致病机制奠定了技术基础。