维氏气单胞菌Cbl蛋白的原核表达及纯化

维氏气单胞菌（<i<Aeromonas veronii</i<）引起的细菌性疾病已威胁到鱼类养殖业的发展。Cbl（类CysB蛋白）是细菌硫代谢的重要调控因子之一。本研究选取pET-28a为Cbl的原核表达载体，以大肠杆菌BL21（DE3）为宿主菌，使用IPTG（Isopropyl-beta-D-thiogalactoside，异丙基−<i<β</i<−D−硫代半乳糖苷）诱导表达，用SDS-PAGE凝胶电泳验证蛋白条带，再用BOSTER的BCA蛋白浓度测定试剂盒测量Cbl蛋白浓度，寻找较适宜的蛋白表达条件。结果表明，当诱导时间为8 h，IPTG终浓度为0.1 mmol·L<sup<−1</sup<，诱导温度为15 ℃，咪唑洗脱浓度为100 mmol·L<sup<−1</sup<时，Cbl蛋白质量浓度能达到601.405 mg·L<sup<−1</sup<，可满足后续实验要求。